Krzyżówka testowa to skrzyżowanie osobnika o nieznanym genotypie z drugim osobnikiem o znanym genotypie, który jest równocześnie homozygotą recesywną pod względem cech branych pod uwagę.
Krzyżówkę testową tworzy się po to, by sprawdzić, czy badany osobnik jest homozygotą dominującą czy heterozygotą.
Krzyżówki testowe tworzy się w przypadku selekcjonowania cech, np. przy uprawie roślin. Krzyżówka testowa znajduje zastosowanie, gdy jeden z alleli dominuje nad innym.