Z pominięciem podniesienia temperatury powyżej 70°C nie byłoby możliwe rozdzielenie DNA na pojedyncze nici w wyniku denaturacji.
Aby cała reakcja mogła przebiegać prawidłowo, wymagane byłoby użycie helikazy, dzięki której rozplotłaby się nić DNA.
Helikaza jest enzymem biorącym udział w procesach replikacji DNA.