Na podstawie krzyżówki heterozygot A. nie można obliczyć odległości między genami sprzężonymi, ponieważ 3. udział procentowy rekombinantów w takiej krzyżówce nie odzwierciedla udział gamet, które powstały po crossing-over.
Aby określić odległość między genami sprzężonymi, należy wykonać dwugenową krzyżówkę testową między podwójną homozygotą recesywną a badanym osobnikiem. Dzięki temu będziemy mogli ocenić częstość zachodzenia procesu crossing-over, co jest równe procentowi uzyskanych rekombinantów.