Powstanie struktury oznaczonej na schemacie literą A, czyli oczka replikacyjnego jest możliwe dzięki działaniu enzymu o nazwie helikaza, która rozrywa wiązania wodorowe między komplementarnymi zasadami azotowymi obu nici DNA, co powoduje rozplecenie podwójnej helisy po obu stronach oczka replikacyjnego.
Poza helikazą, w replikacja biorą udział inne enzymy takie jak:
- prymaza, która odpowiada za wytworzenia startera
- polimeraza DNA, która jest odpowiedzialna za przyłączanie wolnych nukleotydów do matrycowej nici DNA
- ligaza DNA, łączy nowe krótkie odcinki DNA w jeden łańcuch
- topoizomeraza wpływa na stopień skręcenia podwójnej helisy