Hydroliza disacharydów polega na rozpadzie cząsteczki dwucukru na dwie cząsteczki cukrów prostych (monosacharydów) pod wpływem cząsteczki wody. W procesie tym wiązanie glikozydowe, które łączy dwa monosacharydy, zostaje rozerwane. Hydroliza może zachodzić zarówno w obecności enzymów (np. maltaza, laktaza, sacharaza), jak i w środowisku kwaśnym.
Proces ten ma ogromne znaczenie biologiczne, ponieważ umożliwia organizmom trawienie disacharydów do postaci prostych cukrów, które mogą być wchłaniane do krwi i wykorzystywane jako źródło energii.